一、如何测定多糖组分?用什么方法可以测定多糖组分，测定出来的是组成多糖的单糖，还是多糖混合物中的某一多

第一，我认为你把“提取

”和测定搞混了。提取是获得目标物，测定是测定目标物的纯度和活性。

第二。测定的化是单糖还是多糖？这当然取决你的目的物！! 单糖有单糖的方法，多糖有多糖的方法，除非你把多糖水解，否则不可能因为测定把多糖变成单糖。那算是测定吗？成分都变了，那是测杂质?

第三。下面的是多糖的测定方法。

1.蒽酮硫酸比色法。根据糖类脱水生成糠醛或者衍生物。糠醛能够与蒽酮发生蓝绿色颜色反应。直接620nm测一下就好。

2.DNS比色法测定还原糖

3.苯酚硫酸比色法

4.葡萄糖氧化酶测定葡萄糖

5.Nelson法

直接复制名字去百度。

如果想要知道多糖是由什么单糖组成的。可以酶解掉然后跑色谱，根据吸收峰找相应单糖。不过你不做化学合成做这个干嘛，有活性的是多糖。

二、大家是如何测定多糖的

季宇彬.《中药多糖的化学与药理》.

北京:人民卫生出版社.2005.5多糖含量测定（1）显色试剂硫酸法：根据单糖、多糖及其衍生物在硫酸作用下水解、脱水生成糖醛类化合物，与酚类、芳胺类等缩合成有色化合物。苯酚硫酸法生成橙黄色溶液，在490nm处有特征吸收；蒽酮硫酸法生成亮绿色溶液，在630nm处有特征吸收；咔哇硫酸法用于测定糠醛酸（伯醇基氧化：形成糠醛酸，斐林（Fehling）试剂可定量。苯酚-硫酸试剂可与游离的寡糖、多糖中的己糖、糠醛酸起显色反应，己糖在490nm处（戊糖及糠醛酸在480nm处）有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系）。显色试剂硫酸法方便简单，但需严格控制水解条件。（2）DNS法：一个能消除还原性杂质干扰的方法（在氢氧化钠和丙三醇的存在下，还原糖能使DNS还原生成3-氨基-5-硝基水杨酸，在沸水浴中显色2~5min，此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈橘红色，波长在540nm下有最大吸收峰，并且吸光度与还原糖含量有线性关系。试验过程中诸多因素如吸收光谱、显色剂用量、显色时间等均对测定结果有直接影响）。利用3,5-二硝基水杨酸与多糖水解产物还原糖共热后还原成棕红色氨基化合物，于540nm处有特征吸收。（主要参考文献：董文慧,等.云芝肝泰中云芝多糖的工业分析方法.中成药,1990,12(2):33.齐香君,等.3,5-二硝基水杨酸比色法测定溶液中还原糖的研究.

纤维素科学与技术.2004,12(3):17~19）（3）滴定法：有斐林氏滴定法，间接碘量滴定法。（4）气相色谱法：可定性、定量分析多糖的组分及含量，常采用衍生物法以增加其挥发性。一般是将多糖酸水解物或甲醇解（用盐酸-甲醇）物，用三甲基硅烷基化（TMS）或三氟乙酰化（TFA）转化为硅烷化产物或二酰化产物进行气相色谱分析。但乙酰化之前，糖先用KBO4或NaBH4作还原成开链的糖醇化合物较好。多糖用甲醇解方式把半缩醛甲基化，形成甲基糖苷后再TMS化，异构物减少，有利于分辨。常以甘露醇或肌醇为内标，用已知的各种单糖作标准。（5）高效液相色谱法：选用TSK、SW凝胶排斥色谱柱为分离柱，样品经简单预处理，在示差折光检测器中进行检测，以不同分子量的标准右旋糖酐作标准，同时测定样品中多糖的分子量分布情况及其含量。换算因子F的测定参见附件还阳参多糖的定性分析及含量测定.pdf|||常见的方法有：GPC测定多糖分子量及其分布琼脂糖电泳法HPLC方法测定多糖。不同的方法会有些差异。

三、多糖包括哪些种类，它们用什么试剂来测定

多糖主要有淀粉，纤维素，糖原

1、淀粉的鉴定：最简单的方法是加碘液后变蓝

淀粉具有遇碘变蓝的特性，这是由淀粉本身的结构特点决定的。淀粉是白色无定形的粉末，通常由10％～30％的直链淀粉和70％～90％的支链淀粉组成。溶于水的直链淀粉借助分子内的氢键卷曲成螺旋状。如果加入碘酒，碘酒中的碘分子便嵌入到螺旋结构的空隙处，并且借助范得华力与直链淀粉联系在一起，形成了一种分子量较大的络合物，这种络合物能够比较均匀地吸收除了蓝光以外的其他可见光，因此使淀粉呈现出蓝色来。

2、纤维素鉴定：纤维素（cellulose）为β－葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热能分解成β－葡萄糖。β－葡萄糖在强酸作用下，可脱水生成β－糠醛类化合物。β－糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合，生成黄色的糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。

3、糖原的鉴定：（1）浓H2SO4使糖原脱水生成糠醛衍生物，后者再和蒽酮作用形成蓝色化合物

（2）糖原水溶液遇碘呈红棕色，所以也可用碘液鉴定

四、姬松茸多糖怎么测定？

姬松茸（Agaricus Blazei Murill）又名巴西蘑菇，是一种珍贵的兼具食药价值的真菌，具有提高免疫力、抗癌、抗凝血、降血脂、安神等功效〔1〕 。姬松茸多糖是姬松茸中非常重要的一类有效成份〔2〕 ，姬松茸颗粒剂是由姬松茸提取物经加工而制成。本文主要介绍采用苯酚一硫酸法测定姬松茸多糖中多糖的含量，其方法简单，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

VU-210紫外-分光光度计（日本岛津），葡萄糖对照品（分析纯），浓硫酸、苯酚（均为分析纯），姬松茸颗粒自制。

1.2 方法

1.2.1 对照品和供试品的制备

①对照品溶液:精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖4.16mg，置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。②供试品溶液:精密称取本品0.1g，加水2ml，超声处理5min使溶解，加入无水乙醇6ml，放置10min，离心弃去上清液，沉淀加水溶解，用SephadexG-200柱（2.5cm×17cm）层析〔2〕 ，先用0.1mol.L NaCl溶液洗至无糖检出，再用3.9mol.L NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，适当浓缩，置于1000ml容量瓶中摇匀作供试品溶液。

1.2.2 标准曲线的绘制

精密量取葡萄糖对照品溶液0.25ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml，另取2.0ml水作空白，分别置于10ml具塞试管中各加水至2.0ml，加入新配制的6%苯酚溶液1.0ml，置冷水中迅速滴加硫酸5.0ml，并于冷水中放置5min摇匀，再于沸水中加热15min，再次置于冷水浴中5min取出，于490nm处测定吸光度。以葡萄糖用量（浓度）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。葡萄糖0.0013～0.0104mg.ml范围内线性良好，r=0.9993。

1.2.3 精密度试验

取上述标准溶液0.0013mg.ml、0.0052mg.ml、0.0104mg.ml分别检测5次，得RDS分别为0.52%、0.82%、0.74%。

1.2.4 稳定性试验

取上述品溶液0.0013mg.ml、0.0052mg.ml、0.0104mg.ml间隔一定时间测吸收度。结果表明，供试品液在显色后5h内吸光度基本稳定，RSD分别为0.58%、1.23%、0.96%。

1.2.5 回收率试验

取供试品溶液6份，每份1.0ml，分别加入无水葡萄糖对照品溶液0.5ml，按标准曲线项下的含量测定方法，测吸光度，计算回收率，平均回收率为99.32%，RSD=1.37（n=6）。

2 结果

取不同批号的姬松茸颗粒3批按上述供试品溶液制备，分别取供试品溶液1.0ml，另取水2.0ml作空白，分别至于10ml具塞试管中，加水至2.0ml，然后按标准曲线下测定方法测定，结果见表1。表1 样品测定结果（略）

3 讨论

本品中含有较多的多糖，同时辅料对多糖的测定产生了干扰，采用SephadexG-200柱分离后检测，虽然不能代表颗粒中总多糖的含量，却代表了其中的特征成份蛋白多糖〔3〕 。滴加硫酸时，由于放热反应剧烈，为控制反应速度将试管置于冷水中冷却，测得的结果较稳定，重现性好。由于分离提纯相应的多糖标准品较困难，因此本实验采用葡萄糖作对照品，测得结果是以多糖的水解产物单糖来表示多糖的含量。

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